Форум
 
> форум > Помощь в срочных вопросах

Курячих ембріонів використанням вірусів з культивування


Уражені курячі ембріони поміщають до термостату для подальшої інкубації, в процесі якої проходить репродукція внесених вірусів та їх накопичення у відповідних структурах. Температура інкубації ембріонів варіює від 33 до 38 0С в залежності від властивостей вірусу, яким було проведено ураження. За ембріонами ведуть постійне спостереження, переглядають на овоскопі. Загибель ембріонів в перші 24 год після ураження частіше обумовлена розмноженням грибів, бактеріальної мікрофлори, внесених в ембріон разом з інокулятом, або травмованих при ураженні. Ця загибель вважається неспецифічною. У більш пізні. Таким чином, визначити наявність вірусів у матеріалі з курячих ембріонів можна за їх цитопатичною дією. Однак більшість вірусів репродукується в ньому без зовнішніх проявів ураження. Тоді для індикації вірусів застосовують реакцію гемаглютинації.

Принцип її полягає в тому, що віруси здатні, адсорбуючись на мембрані еритроцитів, викликати їх аглютинацію. Кількість віріонів в ембріоні визначають за титром гемаглютинації – найбільшим розведенням матеріалу, при якому ще виявляють склеювання еритроцитів. Титрувати віруси можна також при культивуванні їх на шматочках хоріоналантоїсної оболонки. Виявлення для репродукції вірусів в курячих ембріонах та культурі клітин.

Реакція гемаглютинації, цитопатична дія вірусів, її види. І. у цілому живому організмі (рослин, тварин) - це був перший метод. II. у 30-ті роки Бернет запропонував метод культивування в куриному ембріоні (КЕ).Оцінка достоїнств1) стандартний - використовують 9-1 2 денні КЕ; 2) стерильність;3) можемо заражати різні порожнини (жовточний мішок, ембріон, алантоісна порожнина);4) більш економічно.Недоліки:1) не всі віруси можна культивувати в КЕ;2) у КЕ можуть бути віруси лейкозу курок. 49. Використання клітинних культур у вірусології. Класифікація культур клітин. Поживні середовища для культивування клітин. Г. Курячий ембріон. Курячі ембріони широко використовуються для виділення і розмноження вірусу ще з часу першого опису зараження в порожнину амніону (Burnet, 1940). Класична робота Beveridge і Burnet з культивування вірусів і рік-КЕТС в курячому ембріоні була опублікована в 1946 р. З тих пір майже не було отримано істотних доповнюючих даних. Деякі ранні рекомендації зараз виглядають, однак, застарілими у зв'язку з біологічної мінливістю вірусів грипу. При використанні більш низької дози урожай вірусу може бути низьким, а динаміка репродукції-нерівномірною. Більш високі заражають дози можуть вести, до зниження врожаю (Miller, 1944). Культивування вірусів в організмі тварин 2 Культивування вірусів в курячих ембріонах - сторінка №1/1. План. План 1. Культивування вірусів в організмі тварин 2. Культивування вірусів в курячих ембріонах. Більшість відомих вірусів мають здатність розмножуватися в курячому ембріонові (мал. 4). Використовують ембріони у віці від 8 до 14 днів залежно від виду|вигляду| вірусу, способу зараження і|та| завдань|задач| дослідження. Віруси грипу культивуються в 9-10, вісповакцини| - в 12, паротиту - в 7-денних курячих ембріонах. Розмноження вірусу в курячих ембріонах відбувається|походить| в різних частинах|частках| зародка, що пов'язано з особливостями тропізму вірусу. Дослідження впливу умов культивування на накопичення клонованого вакцинного штаму вірусу інфекційного бронхіту Н120 у вільних від патогенної флори курячих ембріонах. Визначення причин, засобів профілактики та контролю вірусного інфекційного бронхіту. Сельское, лесное хозяйство и землепользование, украинский язык. Культивування вірусів грипу людини в лабораторних умовах, коло господарів серед лабораторних тварин і виділення вірусу з клінічного матеріалу: В. Р.

Даудл і С. ШИЛД (WR DOWDLE, G. С.

SCHILD) I. ВСТУП Вперше пасаж вірусу грипу в експерименті був здійснений на початку століття при роботі з ВЧП, проте до 1955 р. він не'бил віднесений до вірусів грипу (Schafer, 1955). У 1931 р. Shope - - - Медична Бібліотека на веб-сайті medbib.in.ua. Спосіб інфікування курячих ембріонів вірусами ньюкаслської хвороби та інфекційного бронхіту курей, що включає введення штамів вірусів, культивування їх в ембріонах та відбирання екстраембріональної вірусутримуючої рідини з високою інфекційною активністю обох вірусів, який відрізняється тим, що в один ембріон одночасно вводять два штами вірусів загальною дозою 3 lg ЕІД 50/0,2 см3 і культивують їх протягом 120 годин за температури 37,5. Спосіб інфікування курячих ембріонів вірусами ньюкаслської хвороби та інфекційного бронхіту курей, що включає введення штамів вірусів, культивування їх в ембріонах та відбирання екстраембріональної вірусутримуючої рідини з високою.

Лекція 2. Репродукція та культивування вірусів класифікація вірусув. Сутність і генезис проблеми. Поняття репродукції вірусів. - злиття вірусної оболонки з плазматичною мембраною клітини; оболонка вірусу (частіше суперкапсиду складних вірусів) інтегрує (включається, зливається) з плазмолемою клітини, а внутрішній компонент вірусу (нуклеїнова кислота чи нуклеокапсид) проникає в цитоплазму. Швидкість проникнення вірусу залежить від рН та температури: вірус ящуру проникає в клітину за 30 секунд при+37. Використання курячих ембріонів для культивування вірусів людини і тварин. Мета: ознайомлення з використанням курячих ембріонів у вірусологічних дослідженнях, проведення зараження та розтин ембріонів. Матеріали та обладнання: курячі ембріони, вірусвміщуючий матеріал, інструменти (ножиці, пінцети, шприці), склянки для інструментів, лабораторний посуд (піпетки Пастера та мірні на 1, 2, 5 мл, пробірки, колби, чашки Петрі), мікроскоп, лоток, ступка, центрифуга, склянки з ватою, штатив, овоскоп, олівець, підставки для ембріонів, газові та спиртові горілки, 96% етиловий спирт, 2% спиртовий розчин йод. Культивування вірусів в курячому ембріонові. 1. Для культивування вірусів використовують ембріони у віці від 8 до 12 днів. Для вирощування ембріонів запліднені яйця вміщують в термостат при 38° З, в якому знаходиться посуд з водою для створення вогкості. Два рази в день яйця виймають для провітрювання. Періодично яйця переглядають в овоскоп на життєздатність. Живі ембріони відрізняються рухливістю, пульсацією серця, добре контурируемими судинами. Перед зараженням ембріон оглядають в овоскоп і намічують межі повітряного мішка, а також розташування зародка. Існує три моделі для культивування вірусів: курячий ембріон, організм чутливого лабораторного тваринного, культура клітин. Культура клітин - це клітини багатоклітинного організму, вирощені в пробірці. Різновиди культур клітин: первинно трипсінізірована 2. полуперевіваемие 3. перещеплюваних. Лабораторна діагностика проводиться вірусоскопіческім методом з використанням електронної та світлової мікроскопії. При світловій мікроскопії в препаратах і пустул виявляються клітини з тільцями Гварніері. У препаратах з вмісту віспяних бульбашок при фарбуванні по Морозову виявляються тільця Пашена. При серологічному методі виявляють комплементсвязивающіе антитіла вже після першого тижня захворювання. Культивування вірусів проводять також в організмі чутливих лабораторних тварин, зокрема тих вірусів, які не вирощуються в клітинних культурах і ембріонах курчат. Так, для вивчення онкогенних вірусів використовують хом'ячків, агента куру і вірусу гепатиту — приматів, вірусів Коксакі та арбовірусів — мишей. За допомогою кроликів одержують антисироватки. Експерименти з вивчення механізмів патогенезу і ролі імунної відповіді можуть бути проведені тільки на лабораторних тваринах. Культивування вірусів рослин. Для культивування фітопатогенних вірусів використовують сприйнятливі до них рослини, . Культивування вірусів Культивувати віруси можна тільки на біологічних моделях: у організмі лабораторних тварин, в курячих ембріонах, що розвиваються, і культурах клітин. 6. Методи культивування і індикації вірусів Культивування вірусів в організмі лабораторних тварин. 2. 3. Культивування вірусів в тканинних культурах. Клітинна культура - система клітин, що отримується з тканини, знахо-диться у вигляді шару клітин, прикріплених до скла, або у вигляді суспен-зії. Переваги: однаковий тип клітин, проста техніка культивування, можливе використання певних штамів в лабораторних умовах, вищо швидкість розмноження, більш широкий спектр чутливості до вірусу (HeLa, Hep-2, KB). Б3 - суспензійні. 24. Переваги і недоліки використання лабораторних тварин для діагостики вірусів. - Використання для дослідження вірусів які не можна дослідити на культурах клітин або курячих ембріонах. - Вивчення імунної відповіді. - Можуть слугувати як індикатор вільного вірусу. 4.при вивченні розмноження вірусу в організмі тварин, в курячих ембріонах, в культурі клітин. При цьому важливо досліджувати парні сироватки , які беруть в перші дні хвороби та між другим та третім тижнем захворювання. курячі ембріони (отримані з господарства благополучного з інфекційних захворювань птахів) 11-денної інкубації овоскопіровалі. Відбирали яйця з рухомими ембріонами і добре вираженими судинами. На шкаралупі простим олівцем відзначали кордону повітряної камери і розташування зародка. Поверхность шкаралупи протирали йодованим спиртом. Через 24 години культивування моношару клітини частково прикріпилися до скла. Через 48 годин спостерігали рівномірний ост моношару. У процесі культивування колір живильного середовища не змінився. Висновки. 1.Анджапарідзе О.Використання культури тканин в вірусологічних дослідженнях.- М., 1964. 2.Маленков А.Біофізика. Основні методи культивування вірусів. Результати взаємодії вірусів із клітиною господаря. Основні етапи взаємодії вірусу з клітиною господаря. У курячих ембріонах. У клітинних культурах - основний метод. Номенклатура вірусів.Назва родини вірусів закінчується на “viridae”, рода- “virus”, для виду використовують спеціальні назви, наприклад - вірус краснухи, вірус імунодефіциту людини - ВІЛ, вірус парагрипу людини типа 1 і так далі. Практичне використання бактеріофагів. Для ідентифікації (визначення фаготипу). Для фагопрофілактики (купірування спалахів). Зараження курячих ембріонів. Курячі ембріони 6-12-денного віку є зручною моделлю для виділення та подальшої ідентифікації вірусів. Після зараження їх інкубують у термостаті при температурі 36-38 °С протягом декількох днів. Існує два способи зараження курячих ембріонів – відкритий і закритий (рис. 83). Перед проведенням зараження відбирають ембріони, у яких візуально немає пошкодження шкаралупи. Їх просвічують за допомогою овоскопа і відмічають межу повітряного мішка. При відкритому способі шкаралупу над мішком обробляють спиртом і розчином йоду, за допомогою гострих ножиць зрізають шкаралупу, . Проникнення вірусів у клітини. відбувається з використанням двох. механізмів. Основним з них є. Його і нині використовують для культивування багатьох вірусів тварин. Матеріал, що містить вірус, вводять за допомогою шприца або іншим шляхом у курячий ембріон на 8-12 день його розвитку. У 50-ті роки XX століття у практику впровадили методи культивування клітинних культур, що значно вплинуло на розвиток вірусології. Тепер віруси успішно культивують у культурах, що виготовляють з ембріональних тканин тварин і людини. Мета (загальна):характеризувати методи культивування та індикації вірусів в лабораторних умовах для використання цих знань-умінь у комплексі діагнос-тичних заходів на наступних кафедрах. Конкретні цілі – уміти: 1.Проводити зараження курячих ембріонів вірусвмістним матеріалом. 2.Визначати титр вірусу в хоріоналантоїсній рідини зараженого курячого ембріона за допомогою реакції гемаглютинації. 3.Виявляти ЦПД у клітинній культурі, зараженій вірусом. 4.Харктеризувати інші методи індикації вірусів: за геадсорбцією, кольоровою пробою, бляшкоутворенням. Вихідний рівень знань – умінь


культивування вірусів з використанням курячих ембріонів

Тема закрыта
 культивування вірусів з використанням курячих ембріонів
vetalisimus
Сообщение 15.04.2021, 08:43
Сообщение #1


вірусів
*

Группа: культивування Складчик
Сообщений: 602
Регистрация: курячих 13.11.2013
Пользователь №: 19679
Спасибо сказали: 51 раз(а)

Репутация:   21  



культивування вірусів з використанням курячих ембріонів
Admin
Сообщение 15.04.2021, 10:57
Сообщение #2


Лидер
******

Группа: Администраторы
Сообщений: 950
Регистрация: 04.05.2008
Пользователь №: 5
Спасибо сказали: 655 раз(а)

Репутация:   977  



Скачать




Спасибо сказали: 18
jenj5010 (17.02.2021, 10:57), SoloTC (17.02.2021, 10:57), Ekaterina_Pust (17.02.2021, 10:57), mousehouse (17.02.2021, 10:57), Maclion1 (17.02.2021, 10:57), з (17.02.2021, 10:57), stormovic (17.02.2021, 10:57), centuriom24 (17.02.2021, 10:57), TanitaIn (17.02.2021, 10:57), Petras (17.02.2021, 10:57), EdnU4ever (17.02.2021, 10:57), SweetNicol (17.02.2021, 10:57), jcpushkin (17.02.2021, 10:57), Rock82 (17.02.2021, 10:57), Elena32g260678 (17.02.2021, 10:57), Yurena (17.02.2021, 10:57), DESEVRES (17.02.2021, 10:57), Arman (17.02.2021, 10:57)
vetalisimus
Сообщение 15.04.2021, 10:59
Сообщение #3


Новобранец
*

Группа: Складчик
Сообщений: 602
Регистрация: 13.11.2013
Пользователь №: 19679
Спасибо культивування сказали: 51 раз(а)

Репутация:   21  





Admin
Сообщение 15.04.2021, 10:57
Сообщение #4


Лидер
******

Группа: Администраторы
Сообщений: 950
Регистрация: 04.05.2008
Пользователь №: 5
Спасибо сказали: 655 раз(а)

Репутация:   977  







Спасибо сказали: 10
HoneyIra (17.02.2021, 10:57), alixlboy (17.02.2021, 10:57), OxanaVin454 (17.02.2021, 10:57), shekharthakur (17.02.2021, 10:57), mikyroom (17.02.2021, 10:57), JamesMA123 (17.02.2021, 10:57), downunderdaz (17.02.2021, 10:57), BROOKS (17.02.2021, 10:57), PeachD (17.02.2021, 10:57), lilshorty1987 (17.02.2021, 10:57)
vetalisimus
Сообщение15.04.2021, 16:30
Сообщение #5


Новобранец
*

Группа: Складчик
Сообщений: 602
Регистрация: 13.11.2013
Пользователь №: 19679
Спасибо сказали: 51 раз(а)

Репутация:   7  



Цитата(Admin @ 15.04.2021, 10:57) *



MarcucsM
Сообщение15.04.2021, 19:28
Сообщение #6


Новичок
*

Группа: Пользователь
Сообщений: 54
Регистрация: 05.06.2013
Пользователь №: 29907
Спасибо сказали: 5 раз(а)

Репутация:   4  



sam632
Сообщение15.04.2021, 20:34
Сообщение #7


Уважаемый
*****

Группа: Модераторы
Сообщений: 1015
Регистрация: 30.04.2009
Пользователь №: 650
Спасибо сказали: 115 раз(а)

Репутация:   276  





 
Теги: ембріонів використанням
Тема закрыта


RSS | http://spliyansni.blogspot.com/2021/04/4_6.html http://splishoyansni.blogspot.com/2021/03/5_26.html http://spliyansni.blogspot.com/2021/04/2021_45.html http://splishoyansni.blogspot.com/2021/03/blog-post_98.html http://splishoyansni.blogspot.com/2021/03/2.html http://splishoyansni.blogspot.com/2021/03/2021-4.html

Форум IP.Board 2018 © IPS, Inc.